Se compose de six blocs de polymère contenant sept composés fluorescents dont les spectres couvrent une large gamme spectrale avec maxima d'émission de 330 à 582nm et l'excitation maxima de 290 à 562 nm. Cette large gamme spectrale permet à l'utilisateur de choisir un matériau de référence avec globalement similaires à ceux des propriétés spectrales de l'analyte, en assurant un chevauchement raisonnable spectrale des signaux mesurables, sans changer les paramètres importants tels que largeurs de fente et les paramètres wavlength.
Chaque bloc est produite avec des surfaces polies optiquement sur six côtés, avec des dimensions de 12,5 x 12,5 x 45mm pour s'adapter aux détenteurs de cellules standard utilisé dans spectrofluorimeters. Starna est capable de produire ces matériaux dans d'autres tailles et formes tels que des tiges, des cylindres et des disques pour s'adapter autres instruments et devis pour de telles exigences. Certains autres matériaux peuvent également être produites sous une forme similaire à des études spécifiques telles que la phosphorescence, ou singulet et triplet de vie des mesures de temps et demandes sont les bienvenues.
Les spectres de fluorescence ne sont pas absolus dans le sens que les spectres d'absorption sont et l'apparition des spectres dépend de l'instrument particulier et le mode utilisé pour l'enregistrer. La plupart des instruments modernes ont un choix de mode de fonctionnement et cela doit être sélectionné en fonction de l'exigence analytique.
La mesure directe de l'intensité fluorescente produit spectres très déformée. Les effets de l'intensité variable de la source, qui tombe considérablement la longueur d'onde diminue, la sensibilité du détecteur qui a normalement un maximum dans la région proche UV et le débit lumière des monochromateurs qui ont généralement un maximum dans la région UV et dont l'efficacité diminue rapidement au longueurs d'ondes courtes et plus progressivement à des longueurs d'onde, ne sont pas compensées. L'avantage de ce mode est que le nombre minimum de composants optiques sont utilisés et aucun traitement du signal est nécessaire, il peut produire la plus haute sensibilité pour l'analyse quantitative, à condition que les spectres sont simples et les bandes d'intérêt sont bien réglés. Le mode ratio permet à l'instrument pour contrôler l'intensité de la source d'excitation au moyen d'un photomultiplicateur de référence et présente les résultats en termes d'un rapport à ce signal de référence, libérant ainsi le spectre enregistré des effets dus à l'énergie variable de la source. Cela produit un bon signal sur bruit et donc une sensibilité élevée, ainsi que le suivi et la correction de la dérive. Pour l'analyse quantitative, il est généralement le mode de choix, surtout pour les échantillons qui produisent des spectres plus complexes.
La Spectra Correction du mode produit un spectre dans lequel de nombreux effets ci-dessus sont compensées, généralement par des manipulations spectrales avec un ordinateur, bien que certains instruments anciens peuvent toujours utiliser les méthodes électrooptiques pour réaliser les ajustements. Ce mode produit un spectre d'excitation qui a des caractéristiques similaires à celle du spectre d'absorption UV-Visible. La sensibilité des spectres de fluorescence est beaucoup plus élevée que celle du spectre d'absorption, mais les comparaisons directes peuvent encore être apportées, comme les formes sont similaires. Il est également possible d'effectuer des mesures de rendement quantique et le calcul du rendement énergétique à partir des spectres corrigés.
Cette fonctionnalité peut être utile si l'instrument est utilisé pour aider à l'identification de l'analyte, car ces propriétés sont connues pour un grand nombre de substances. Ce mode permet également la comparaison des données de différents instruments qui devrait montrer des longueurs d'onde d'excitation semblable pour les maxima et minima, ainsi que des valeurs similaires pour des rapports de l'intensité des bandes différentes et des formes similaires pour les bandes spectrales. Ces spectres sont particulièrement utiles pour les études de la publication et inter-laboratoires, comme des spectres non corrigées, même ceux exécutés sur le même type d'instrument, comprendra les diverses distorsions introduites par l'appareil en particulier.
Les spectres des matériaux fournis dans cet ensemble de documents de référence sont bien établis et leurs maxima et minima peuvent être utilisés pour vérifier l'étalonnage de longueur d'onde d'instruments qui fonctionnent avec des largeurs de bande spectrale étroite. Les matériaux qui produisent des bandes étroites, tels que l'anthracène et ovalene sont particulièrement adaptés à cette application. Cependant, il est important de s'assurer que ces étalonnages sont effectués dans le mode corrigé à petite largeur de bande spectrale, ou les erreurs peuvent être introduites par l'élargissement du pic ou de longueur d'onde apparente décalages dus à des effets instrumentaux.
Les spectres illustrés ont été obtenus en utilisant un spectrofluorimètre Perkin Elmer LS50B et les largeurs de bande spectrale 2,5 Nm pour tous les spectres. Ces spectres sont à titre indicatif seulement et peuvent varier de forme, si différentes largeurs de bande spectrale sont utilisées. Les longueurs d'onde de pointe ne sont comparables pour les instruments fonctionnant dans le mode spectres corrigés. Si ce mode n'est pas disponible, il est important que tous les réglages de l'instrument sont reproduites exactement à chaque occasion, afin d'assurer que les comparaisons ultérieures sont valides.
Spectrométrie de fluorescence moléculaire est une technique plus sélective que spectrophotométrie UV-visible. Matériel No.1 contient un mélange d'anthracène et le naphtalène et peut être utilisé pour démontrer la plus grande sélectivité de la technique de fluorescence. En excitant à deux longueurs d'onde différentes, le spectre d'émission de ces deux substances peuvent être obtenus gratuitement d'interférence de l'autre.
Jasco vous propose tout une gamme d'étalons qui vous permettra de mieux connaitre l'usure de vos fluorimètres et de les valider.
Tous les étalons pour spectrofluorimètres sont certifiés NIST. (Nous consulter pour les non certifiés)
| Sample Number | Compound | Approximate Molar Conc | Excitation Wavelength | Emission Wavelength |
|---|---|---|---|---|
| 1 | Anthracene | 1 x 10-5 | 360 | 402 |
| Napthalene | 6 x 10-5 | 290 | 330 | |
| 2 | Ovalene | 2 x 10-7 | 342 | 482 |
| 3 | p-Terphenyl | 5 x 10-7 | 295 | 338 |
| 4 | Tetraphenylbutadiene | 3 x 10-7 | 348 | 422 |
| 5 | Compound 610 | 1 x 10-6 | 440 | 475 |
| 6 | Rhodamine | 2 x 10-7 | 562 | 573 |
R M No. 1 Anthracène
R M No. 1Napthalene
R M No. 2 Ovalene
R M No. 3 p-Terphenyl
R M No. 4 Tetraphenylbutadiene
R M No. 5 Compound 610
R M No. 6 Rhodamine
| CODE | DESIGNATION |
|---|---|
| 6BF 6BF | Kit of 6 standards |
| 6BFSTD/1 | Naphthalene/Anthracene |
| 6BF STD/2 | Ovalene |
| 6BF STD/3 | p-Terphenyl |
| 6BF STD/4 | Tetraphenylbutadiene |
| 6BF STD/5 | Compound 610 |
| 6BF STD/6 | Rhodamine B |
| 6BF STD/E | Europium III PMMA |
| 3/Q/10/H20 | Water Cell(Water Raman Reference) |
| 3/Q/10/Europium | Europium III Cell |
| 4-TB/Rhodamine 101 | Rhodamine 101 Cell |
| 41900-0010 | Rhodamine B Laser Grade >99% |
| SRM-936a | Sulfate de quinine dihydratée certifiée NIST |
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